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2025-01-10 17:02:33動力學(xué)顯色檢測法轉(zhuǎn)換
動力學(xué)顯色檢測法轉(zhuǎn)換指的是在動力學(xué)顯色檢測過程中,將一種信號或參數(shù)轉(zhuǎn)換為可量化分析的數(shù)據(jù)的過程。它基于化學(xué)反應(yīng)速率與顯色程度的關(guān)系,通過監(jiān)測反應(yīng)體系中的顏色變化,并將其轉(zhuǎn)換為光密度、吸光度等可測量的信號,從而實現(xiàn)對待測物質(zhì)的定量或定性分析。該方法廣泛應(yīng)用于環(huán)境監(jiān)測、食品安全及生物醫(yī)藥等領(lǐng)域,具有靈敏度高、選擇性好及操作簡便的技術(shù)優(yōu)勢。

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2022-12-04 19:40:01高內(nèi)涵應(yīng)用案例——線粒體動力學(xué)檢測和表型分析
引言新陳代謝是生物體內(nèi)進行的化學(xué)變化的總稱,是生物最基本的生命活動過程。細胞從環(huán)境汲取能量、物質(zhì),在內(nèi)部進行各種化學(xué)變化,維持自身高度復(fù)雜的有序結(jié)構(gòu),保證生命活動的正常進行。作為細胞的“能量工廠”,線粒體在維持能量穩(wěn)態(tài)方面發(fā)揮重要作用,可以調(diào)控蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、溶質(zhì)和代謝物產(chǎn)物的進出,并保護細胞質(zhì)免受有害線粒體產(chǎn)物的影響。線粒體通過不斷的分裂和融合,維持線粒體形態(tài)、分布和數(shù)量,維持細胞穩(wěn)態(tài),該過程被稱為線粒體動力學(xué)。線粒體自噬是機體清除細胞內(nèi)功能異常的線粒體的過程,是線粒體質(zhì)量控制的主要機制。線粒體動力學(xué)的病理改變可導(dǎo)致生物能量功能受損和線粒體介導(dǎo)的細胞死亡,并與多種病理機制相關(guān),包括缺血性心肌病,糖尿病,肺動脈高壓,帕金森氏病,亨廷頓氏病,骨骼肌萎縮癥、阿爾茨海默病等。線粒體大小和形狀取決于它們在細胞內(nèi)的位置以及不同細胞對能量的需求。當線粒體發(fā)生損傷時,它的形態(tài)和完整性會發(fā)生改變,如線粒體的數(shù)量、大小、長度和形狀等。線粒體形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能的檢測對于了解線粒體的穩(wěn)態(tài)以及功能狀態(tài)有重要意義。高內(nèi)涵成像分析系統(tǒng)非常適合進行線粒體表型和結(jié)構(gòu)的研究。共聚焦成像和水鏡可以提高成像質(zhì)量并更好地顯示線粒體結(jié)構(gòu),高內(nèi)涵的圖像分析工具可以幫助科研工作者獲得不同表型的數(shù)字特征,線粒體表型和結(jié)構(gòu)重排的分析模塊可用于線粒體動力學(xué)為基礎(chǔ)的細胞研究。 結(jié)果展示使用不同濃度的化合物,包括氯喹(抑 制線粒體循環(huán)),魚藤酮(氧化磷酸化抑 制劑)和纈氨霉素(鉀離子載體)處理 PC12(人神經(jīng)母細胞瘤細胞)。將活細胞用線粒體染料 MitoTracker Orange  和 Hoechst 進行染色,利用 ImageXpress Micro Confocal 系統(tǒng)(Molecular Devices)進行成像,使用共聚焦模式和 40X 水鏡拍攝活細胞的圖像,分辨單個線粒體并檢測線粒體形態(tài)變化。使用 MetaXpress 高內(nèi)涵圖像采集和分析軟件中的 Custom Module Editor(自定義模塊編輯器)分析圖像,使用“Granularity”模塊和“Find Fibers”模塊識別圓形顆粒和細長的線粒體(圖 1)。圖 1 .線粒體形狀的表型分析。Molecular Devices 高內(nèi)涵成像分析系統(tǒng)適用于各種細胞模型中化合物的藥物開發(fā)或毒性評估。不同化合物處理會導(dǎo)致線粒體形態(tài)變化,膜電位的損失、以及細胞的程序性死亡等。MetaXpress 軟件非常適合進行線粒體形態(tài)的測定,可以定義每個對象的數(shù)量、面積、強度、長度和形狀(表1,2)。使用具有共聚焦模式的 40X 水鏡對細胞進行成像,MetaXpress 自定義模塊編輯器分析圖像(圖 2)。這些檢測結(jié)果可以計算劑量反應(yīng)和各種化合物的有效濃度,以及用數(shù)字來表征線粒體結(jié)構(gòu)動力學(xué)(圖 3)。圖 2 .化合物對線粒體的作用。使用MitoTracker Orange對線粒體進行染色( 黃色 ),對照組(A)、纈霉素(B)、魚藤酮(C)。使用特定濃度的化合物(氯喹,魚藤酮和纈氨霉素)處理 PC12 細胞,對細胞進行染色和成像。通過圖像分析將線粒體結(jié)構(gòu)確定為“纖維”(頂部)或“顆粒”(中部),底部為線粒體染色后熒光強度的變化。EC50的值取決于四個濃度依賴性復(fù)本和參數(shù)曲線的擬合(圖 3)。圖 3 .使用氯喹(綠色),魚藤酮(紅色)和纈氨霉素(藍色)處理 PC12 細胞。EC50的值取決于四個濃度依賴性復(fù)本和參數(shù)曲線的擬合。在分析過程中,我們比較了水鏡和空氣鏡對圖像質(zhì)量和分析的影響。結(jié)果顯示,使用水鏡可以提高圖像質(zhì)量,并且通常會導(dǎo)致 Z' 值增加( 表 3 )。圖 4 顯示了使用自定義模塊編輯對線粒體表型進行計數(shù)和分析,以評估線粒體的健康、代謝、循環(huán)、復(fù)合效應(yīng)和疾病狀態(tài)等。并且,自定義模塊編輯可以針對特定的細胞類型或疾病模型進行進一步的調(diào)整和修改。表 1 .用圖 3 所示的曲線定量 EC50。表 2 .不同的對照和化合物處理方法的比較。上面四列數(shù)據(jù)分別是對照,10 um 的氯喹,300 nm 的魚藤酮,和 10 nm 的纈氨酸霉素。表 3 .與空氣鏡相比,水鏡可以提高圖像質(zhì)量,獲得更高的Z’值。 圖 4 .自定義模塊編輯器(CME)。 總結(jié)Molecular Devices 高內(nèi)涵成像分析系統(tǒng)適用于各種細胞模型中化合物的藥物開發(fā)或毒性評估。使用高內(nèi)涵成像和高級圖像分析的線粒體動力學(xué)分析方法不僅可以量化線粒體的表型變化,而且這種多參數(shù)方法也可用于研究正常和病理結(jié)構(gòu)變化以表征疾病模型或復(fù)合效應(yīng)。 主要特點 獲得高質(zhì)量的圖像,更好地顯示線粒體形狀和結(jié)構(gòu)的變化以更有效、更精確的方式量化和測量線粒體的表型變化了解疾病的機制并評估各種細胞模型中的化合物毒性參考文獻:[1]. Gottlieb RA, Bernstein D. Mitochondrial remodeling: Rearranging, recycling, and reprogramming. Cell Calcium, 2016, 60(2): 88–101.[2]. Yoon Y, Krueger EW , Oswald BJ , et al. The Mitochondrial Protein hFis1 Regulates Mitochondrial Fission in Mammalian Cells through an Interaction with the Dynamin-Like Protein DLP1. Molecular & Cellular Biology, 2003, 23(15):5409-5420.[3]. McLelland GL, Soubannier V, Chen CX, et al. Parkin and PINK1 function in a vesicular trafficking pathway regulating mitochondrial quality control. Embo Journal. 2014, 33(4):282-295.[4]. Twig G, Elorza A, Molina AJ, et al. Fission and selective fusion govern mitochondrial segregation and elimination by autophagy. Embo Journal. 2008, 27:433–446.[5]. Longo DL , Archer SL . Mitochondrial dynamics--mitochondrial fission and fusion in human diseases. New England Journal of Medicine, 2013, 369(23):2236-2251.[6]. Qi X, Disatnik MH, Shen N, et al. Aberrant mitochondrial fission in neurons induced by protein kinase C{delta} under oxidative stress conditions in vivo. Molecular biology of the cell. 2011, 22(2):256–265.[7]. Yu T, Sheu SS, Robotham JL, Yoon Y. Mitochondrial fission mediates high glucose-induced cell death through elevated production of reactive oxygen species. Cardiovascular Research. 2008, 79:341–351.[8]. Ong SB, Subrayan S, Lim SY, et al. Inhibiting Mitochondrial Fission Protects the Heart Against Ischemia/Reperfusion Injury. Circulation, 121(18), 2012-2022.[9]. Suen DF, Norris KL, Youle RJ. Mitochondrial dynamics and apoptosis. Genes Dev. 2008, 22:1577-590.[10]. Konopka AR, Suer MK, Wolff CA, et al. Markers of Human Skeletal Muscle Mitochondrial Biogenesis and Quality Control: Effects of Age and Aerobic Exercise Training. The Journals of Gerontology. 2014, 69(4):371-378.
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2023-06-09 18:08:32生物柴油含量檢測-時域核磁法
為什么要檢測生物柴油含量?生物柴油是一種由植物油、動物油、廢棄物油脂等生物質(zhì)材料經(jīng)過酯化、脫水等化學(xué)反應(yīng)制成的油品,其化學(xué)成分和石油柴油基本相同,但具有更高的氧含量和較低的排放,是一種可再生的清潔能源。通過將柴油與生物柴油混合,可以減少柴油排放,有關(guān)立法已經(jīng)完成,要求在石油柴油與生物柴油混合物中引入最-低水平的生物柴油。因此,有必要制定出標準的試驗方法來測定柴油-生物柴油混合物中的生物柴油含量,以便實施此類立法。生物柴油含量檢測-時域核磁法時域核磁的弛豫行為(弛豫時間、信號幅度、峰面積)和樣品中分子的運動性及質(zhì)子含量有關(guān)。柴油主要由長鏈烷烴組成,生物柴油中含有甲基亞油酸甘油酯等大量的不飽和脂肪酸甘油酯,兩者分子運動性有著明顯差異,信號幅度/峰面積和分子量呈正相關(guān),利用此特性可區(qū)分柴油、生物柴油并定量混合柴油中生物柴油含量。                     生物柴油含量與信號幅度關(guān)系曲線時域核磁法檢測生物柴油含量的優(yōu)勢1、雖然樣品需要恒溫處理,但核磁法測量時間短(通常幾十秒),測試過程簡單;2、儀器操作簡單,簡單需培訓(xùn)即可使用儀器;3、核磁共振技術(shù)是無損檢測技術(shù),可對同一樣品進行重復(fù)測量或進行其他測量;4、核磁法校準方便,儀器穩(wěn)定可靠;5、可現(xiàn)場、可在線測量;核磁共振分析儀PQ001-GU
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2022-02-09 15:38:29低場核磁共振法用于聚合物的分子動力學(xué)研究-交聯(lián)密度、老化過程
低場核磁共振法用于聚合物的分子動力學(xué)研究-交聯(lián)密度、老化過程、填充劑在工業(yè)生產(chǎn)過程中和研究型實驗室里需要有一種快速、有效、簡單實用的方法來評價交聯(lián)密度。低場核磁法非常適合在生產(chǎn)領(lǐng)域中對交聯(lián)密度變化點檢測,核磁法簡單易用,可以作為聚合物生產(chǎn)過程中質(zhì)量控制的工具。同時低場核磁對聚合物的分子動力學(xué)非常敏感,可以用于多尺度的分子動力學(xué)研究,為聚合物改性、配方、老化、性能評價提供可靠數(shù)據(jù),是一款科研利器。低場核磁法的主要檢測對象是氫核(1H),由于聚合物中不同鏈段上的H所處的周圍環(huán)境不一致,H的自旋磁矩(核自旋)存在差異。施加射頻脈沖后,自旋系統(tǒng)在恢復(fù)熱平衡狀態(tài)的過程中表現(xiàn)出來的弛豫行為不同,通過弛豫時間的差異可以體系聚合物的分子動力學(xué)信息。而分子分子動力學(xué)信息直接與聚合物的交聯(lián)密度、老化、填充劑相關(guān)。分子內(nèi)和分子間氫質(zhì)子的偶極相互作用產(chǎn)生核磁共振的橫向弛豫。當溫度遠遠高于聚合物的玻璃態(tài)溫度時,聚合物網(wǎng)絡(luò)中的這種偶極相互作用被認為是熱分子運動的平均。由于聚合物單鏈中的氫質(zhì)子被作為核磁共振測量的探針,于是一種修正的單鏈模型被引入并用來解釋聚合物的橫向弛豫。低場核磁共振法可用于研究:1、活化能的測定;2、天然橡膠交聯(lián)密度測試;3、硫含量對橡膠交聯(lián)的影響;4、促進劑種類和用量對橡膠交聯(lián)的影響5、氧化鋅和硬脂酸含量對橡膠交聯(lián)的影響6、橡膠硫化過程中對應(yīng)的磁共振模型參數(shù)的演化7、混煉時間對磁共振模型參數(shù)的影響8、納米黏土含量對橡膠交聯(lián)的影響變溫核磁共振分析儀
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2022-12-28 17:00:18飼料脂肪含量檢測(低場核磁法)
飼料脂肪含量檢測(低場核磁法)飼料中脂肪含量的作用脂肪是蕞有效的能量來源,脂肪與碳水化合物及含氮化合物共同作為生物體的三大組成部分,它不僅是天然飼料中主要營養(yǎng)物質(zhì),也是高能配合飼料不珂缺少的重要原料。飼料中適當?shù)闹竞靠梢蕴娲饶苤档奶妓衔锖偷鞍踪|(zhì),能提高飼料代謝能,使消化過程中能量消耗減少,熱增耗降低,使飼料的凈能增加。飼料中適當?shù)闹竞繒o動物的生長速度產(chǎn)生影響。飼料中的脂肪對于動物的好處非常多,那是不是飼料中脂肪含量越高越好呢?其實不然,飼料中的脂肪對于動物養(yǎng)殖也是一把雙面刃劍,它帶來好處的同時也需要我們?nèi)リP(guān)注它的弊端。脂肪是飼料及其原料中僅次于蛋白質(zhì)的主要品質(zhì)項目,所以脂肪含量是動物飼料生產(chǎn)過程中重要的營養(yǎng)和質(zhì)量控制參數(shù),需要快速、可靠的測量方法來優(yōu)化生產(chǎn)工藝。索氏抽提法與低場核磁法傳統(tǒng)飼料脂肪含量的測定方法采用索氏抽提原理,檢測結(jié)果的影響因素非常多,主要包括樣品顆粒、抽提溶劑、抽提時間、天平和烘箱的準確度、抽提裝置的性能、環(huán)境溫度、所用器具清潔度、樣品中水分含量水平、操作人員水平等。測試時間也非常長,不能實時監(jiān)控產(chǎn)品質(zhì)量。低場核磁法無需干燥處理即可測量含水率在9-14%動物飼料中的脂肪含量,測試過程快速無損,結(jié)果準確可靠,可用于工廠現(xiàn)場測試,為工廠質(zhì)量控制提供有力的保障。紐邁PQ001系列低場核磁共振分析儀低場核磁法測試飼料脂肪含量基本原理:可以通過核磁共振弛豫快慢來測定樣品不同組分中氫質(zhì)子的含量。在動物飼料中,水與固體基質(zhì)緊密結(jié)合,而脂肪是游離狀態(tài)。可以根據(jù)弛豫快慢的差異將水信號與脂肪信號進行分離,從而實現(xiàn)脂肪定量測試。下圖是低場核磁法自旋回波序列與檢測到的核磁信號。在90度射頻脈沖后t1處測量了自由感應(yīng)衰減(FID)NMR信號。此時信號幅度(A1)是樣品中水分和脂肪的信號總和。180度脈沖后,檢測自旋回波信號幅度為A2,此時水的信號已經(jīng)衰減為0,A2僅為脂肪的信號,根據(jù)信號強度與脂肪含量的對應(yīng)關(guān)系即可對脂肪含量進行定量測試。
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2023-06-29 13:48:02熱氣流固結(jié)纖維網(wǎng)串珠結(jié)構(gòu)可控性 及其結(jié)晶動力學(xué)
HS-DSC-101差示掃描量熱儀是一種測量參比端與樣品端的熱流差與溫度參數(shù)關(guān)系的熱分析儀器,主要應(yīng)用于測量物質(zhì)加熱或冷卻過程中的各種特征參數(shù):玻璃化轉(zhuǎn)變溫度Tg、氧化誘導(dǎo)期OIT、熔融溫度、結(jié)晶溫度、比熱容及熱焓等.熱氣流固結(jié)纖維網(wǎng)串珠結(jié)構(gòu)可控性 及其結(jié)晶動力學(xué)【1. 東華大學(xué)紡織學(xué)院 2. 東華大學(xué)紡織面料技術(shù)教育部重點實驗室 3. 東華大學(xué)產(chǎn)業(yè)用紡織品教育部工程研究中心 周鈴;靳向煜】熱氣流固結(jié)纖維網(wǎng)串珠結(jié)構(gòu)可控性 及其結(jié)晶動力學(xué)熱氣流固結(jié)纖維網(wǎng)串珠結(jié)構(gòu)可控性 及其結(jié)晶動力學(xué)上海和晟 HS-DSC-101 差示掃描量熱儀
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