產(chǎn)品編號(hào)：M003

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

本公司生產(chǎn)的Lysis Buffer是一種適用于細(xì)胞、組織及細(xì)菌的總RNA抽提試劑。

包裝規(guī)格

有效期12個(gè)月。

注意事項(xiàng)

• 本產(chǎn)品僅限于科學(xué)研究使用。
• 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴護(hù)目鏡、一次性手套和口罩操作。
• 所有相關(guān)器皿耗材都應(yīng)為RNase-free產(chǎn)品，操作過(guò)程要小心，避免環(huán)境中RNA酶污染樣品。
• 需自備異丙醇，DEPC水(貨號(hào)：M004)，75%乙醇(DEPC水配制)。

操作說(shuō)明

1. 樣本處理：
2. 組織：取新鮮或-70℃凍存100mg組織加1mLLysis Buffer，充分勻漿。
3. 貼壁細(xì)胞：吸盡培養(yǎng)基，每10⁶細(xì)胞加1mL Lysis Buffer，吹打混勻。
4. 懸浮細(xì)胞：離心收集細(xì)胞，每10⁶動(dòng)物、植物和酵母細(xì)胞或每10⁷細(xì)菌細(xì)胞加1mLLysis Buffer，吹打混勻。
5. 室溫放置5min，使核酸蛋白復(fù)合物完全分離。
6. 每1mL樣品中加2mL RNA pure，蓋好管蓋，劇烈振蕩15s，室溫放置3min。
7. 4℃ 12000 rpm離心15min，小心吸取上層無(wú)色水相至新管中。
8. 按每毫升最初的Trizol加入5mL異丙醇，顛倒數(shù)次混勻，室溫沉淀10min。如果希望提取 microRNA 等 小 RNA，推薦-70℃沉淀過(guò)夜。
9. 4℃ 12000 rpm離心10min，管底可見(jiàn)RNA沉淀，棄上清。
10. 按每毫升最初的Trizol加入1ml 75%乙醇，顛倒混勻，4℃ 8000 rpm離心5min，棄上清。
11. 4℃ 5000 rpm離心15s，小心吸盡液體。
12. 開蓋室溫放置數(shù)分鐘，待RNA略干后，加入DEPC水溶解，-70ºC凍存。注意：切勿讓RNA過(guò)分干燥，否則將極難溶解，且測(cè)出的A260/280值會(huì)低于6。