產品描述

本品采用了逆轉錄病毒載體，使用SARS-CoV-2 Spike蛋白基因替換逆轉錄病毒的包膜蛋白基因，與逆轉錄病毒包裝質粒和CMV-GFP-T2A-Luciferase質粒共轉染293T細胞，包裝含Spike蛋白突變位點(BA1.1)基因的假病毒，假病毒表面能表達SARS-CoV-2 Spike蛋白，并且病毒同時攜帶GFP和Luciferase熒光素酶報告基因，可通過觀察熒光信號和檢測熒光素酶活性評價假病毒感染細胞的活性，該假病毒無自主復制能力，安全性好，可用于SARS-CoV-2受體和藥物篩選、中和抗體檢測及疫苗效果評價等試驗。

BA1.1是以NCBI Reference Sequence: NC_045512.2中的Spike蛋白為假病毒刺突蛋白，具體突變位點為:A67V、 H69-、 V70-、T95I、G142-、V143-、Y144-、Y145D、N211-、L212I、R346K、G339D、S371L、S373P、S375F、S477N、T478K、 E484A、Q493R、G496S、Q498R、N501Y、Y505H、T547K、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、N856K、 Q954H、N969K、L981F。

產品組分

運輸與保存方法

干冰運輸。-80℃保存，有效期6個月。本品應避免反復凍融，建議分裝保存。

注意事項

1、每批次病毒滴度均達到1×10⁶ TU/mL（HEK293T- ACE2）及以上，具體病毒滴度請參考具體批次號COA。

2、凍融會導致假病毒穩定性降低，從而影響核酸抽提效果和QPCR檢測結果，使用時應避免反復凍融。

3、病毒操作時務必在二級或以上生物安全實驗室或生物安全柜中進行，不可使用普通超凈工作臺操作病毒。

4、為了您的安全和健康，請穿實驗服，戴口罩并戴一次性手套操作。

5、如果使用時本品不慎濺到眼睛、皮膚或其他身體部位，請立即使用大量清水沖洗。

6、使用本品所產生的實驗廢棄物需要通過高壓滅菌處理，按照醫療廢棄物處理要求進行處理。

7、本產品僅供科研使用。

使用方法

1、細胞鋪板：

實驗前一天，將待感染HEK293T-ACE2細胞接種于96孔細胞培養板中，接種量約為1×10⁴個細胞/孔，第二日，待細胞密度在30%左右時進行病毒感染。

2、假病毒感染：

取出凍存的假病毒置于冰上融化或4℃條件下待其完全融化后，設計濃度梯度（一般需要設計3個濃度梯度），加入細胞培養體系中感染目的細胞。以HEK293T- ACE2細胞為例，加入病毒量約為0.1-1 μL/孔，病毒感染6h后更換新鮮培養基繼續培養。

3、感染檢測：

細胞感染假病毒換液48h后，通過熒光顯微鏡或共聚焦顯微鏡觀察綠色熒光蛋白表達并檢測熒光素酶的活性以判定感染效率（假病毒對不同細胞的感染效率不同，正式實驗前建議進行預實驗，以確定最合適病毒添加量）。

HB220801