離子交換主要包括強陽離子交換、弱陽離子交換、強陰離子交換和弱陰離子交換4種，廣泛用于生物制藥和生物工程下游蛋白質、核酸及多肽的分離純化。

本品Magnify SP HP是一種強陽離子交換層析介質，以表面接枝了葡聚糖的高剛性瓊脂糖為基架，具有高流速狀態下仍具有高的動態結合能力的優點，可以很好的提高工業下游工藝的生產效率。且本品平均粒徑在40 μm左右，具有更高的比表面積，更高的載量和分辨率。本品離子交換基團-SO₃^–。

產品性質

運輸和保存方法

冰袋運輸。4-30℃保存，有效期5年。

使用方法

1 緩沖液的準備

所用水和Buffer在使用前最好用0.22 µm或0.45 µm濾膜過濾。下表為常用的陽離子交換緩沖液。

表1：陽離子交換緩沖液

2 樣品準備

樣品在使用前最好用0.22 µm或0.45 µm濾膜過濾，減少雜質，提高蛋白純化效率和防止堵塞柱子。

3 樣品純化

1）將介質裝入合適的層析柱，層析用5倍柱體積的結合Buffer進行平衡，使填料處于與目的蛋白相同的緩沖體系下，起到保護蛋白的作用。

2）將樣品加到平衡好的Magnify SP HP中（保證目的蛋白與填料充分接觸，提高目的蛋白的回收率），收集流出液。

3）用10-15倍柱體積的洗雜Buffer進行清洗，去除非特異性吸附的雜蛋白，收集洗雜液。

4）使用5-10倍柱體積的洗脫Buffer，收集洗脫液，即目的蛋白組分。

5）依次使用3倍柱體積的結合Buffer和5倍柱體積的去離子水平衡填料，最后再用5倍柱體積的20%的乙醇平衡，然后保存在等體積的20%的乙醇中，置于4度保存，防止填料被細菌污染。

4 填料清洗

離子交換樹脂每次使用后可以用1M NaCl 甚至更高離子強度溶液或高pH溶液清洗，然后用至少5倍柱體積的Buffer 進行平衡至離子強度或pH值穩定。

CIP（Cleaning In Place）清洗

離子交換樹脂可以重復使用而無需再生，但隨著非特異性結合的蛋白的增多和蛋白的聚集，往往造成流速和結合載量都下降，這時可按照下面方法對樹脂進行清洗。

1）去除一些沉淀或變性物質

用2倍柱體積的1M NaOH 溶液進行清洗，然后立即用5倍柱體積的PBS, pH7.4清洗。

2）去除一些疏水性吸附造成的非特異性吸附物質

用3-4倍柱體積的70%乙醇或3-4倍柱體積的1% Triton™ X-100 清洗，然后立即用5倍柱體積的PBS, pH7.4清洗。

3）去除一些離子鍵結合物質

用3-4倍柱體積的2M NaCl清洗，然后立即用5倍柱體積的PBS, pH 7.4清洗。

注意事項

1）請勿冷凍保存本產品。

2）填料使用前一定要充分顛倒若干次，使瓊脂糖珠混合均勻。

3）所有操作過程中，樣本需要在4℃或冰上操作。

4）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

5）本產品僅作科研用途！

附表 問題及解決方案

HB220629