Fluo-Oil 135 是Emulseo 提出的一種氟化油，作為3M Novec HFE7500油的替代品。 Fluo-Oil 135 的化學和物理化學性質與NovecTM 7500 相似，如下表所示:

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優勢
生物相容性、可重復性和穩定性。

如何使用？
氟化油Fluo-Oil 135用于稀釋Emulseo表面活性劑或已經用Fluo-Oil 135油稀釋的表面活性劑。

保存
室溫下避光保存

安全注意事項
● 避免吸入、攝入和接觸皮膚和眼睛
● 穿戴耐化學腐蝕的個人防護裝備
● 戴上合適的手套
● 穿合適的防護服
● 戴側護罩的安全眼鏡

與3M HFE7500油產生液滴性能的測試比較
分別用3M HFE7500和Fluo-Oil 135氟化油稀釋FluoSurf neat表面活性劑，得到4w/w%的質量濃度。

水滴產生或油包水液滴產生的兩相流速：
油相流速為300μL/hr，水相流速為100μL/hr。
水相為PBS溶液或100μM熒光素的PBS溶液（用于測試液滴的泄露）

倒置顯微鏡觀察和Image J軟件分析。

一、液滴尺寸及其分布

在Fluo-Oil 135和HFE7500油中，產生相似尺寸的水滴。在既定流速參數下，液滴的平均直徑為110μm。液滴尺寸的CV分別為2.3%（Fluo-Oil 135油）和2.9%（HFE7500油）。

二、液滴穩定性
大多數研究團隊使用液滴微流體進行細胞封裝或 PCR 應用。 因此，需要通過 PCR 的加熱循環以及在 37°C 下長期孵育來產生穩定的液滴。 表面活性劑的選擇至關重要，但選擇油同樣重要，以確保可重復的實驗以及單分散液滴群的生成和保存。

分別從三個方面測試液滴的穩定性：一是把液滴重新注入到玻璃觀察腔室內；二是經典的PCR熱循環過程，循環過程30次，每次熱循環為98°C運行10s, 50°C運行5s, 72°C運行10s；三是置于37℃的培養箱內放置3天。對1萬個液滴進行分析。

無論是在 Novec? HFE 7500 還是 Fluo-Oil? 135 中形成 FluoSurf? 穩定的液滴，在 PCR 加熱循環后或在 37°C 孵育 3 天后，液滴平均尺寸在生成時保持不變 [約 110μm (0.7nL)] 。此外，液滴種群仍然是單分散的。 根據統計分析，計算出在加熱循環后，只有 5% 的整體液滴的大小與平均初始液滴直徑的差異超過 10%。

將氟化油從 Novec? HFE 7500 切換到 Fluo-Oil? 135 對液滴穩定性沒有影響。

三、液滴內的分子滯留

基于液滴的化學或生化分析依賴于試劑在單個液滴中保持隔離。 泄漏到連續相和液滴之間的交換，即使很低，也會影響結果的完整性，因此，分子保留是選擇氟化油時要考慮的重要參數。 眾所周知，氟化油會限制液滴之間的分子交換，因此應驗證切換油的影響。

同時生成兩種油包水乳液[“空”（負載 PBS）和“滿”（負載熒光素）液滴]，一次使用 Novec? HFE7500，然后使用 Fluo-Oil? 135 作為連續相。 兩種混合物，每一種都包含兩個種群，在 37°C 下孵育，并在不同的時間點拍攝照片。 使用 ImageJ 軟件對液滴內熒光強度的演變進行了統計定量分析。

上圖顯示了兩個群體之間平均熒光強度差異的演變（染料加載和空液滴）以及在初始時間點和 48 小時后相關的熒光和明場圖片。

在 24 小時的過程中，兩種氟化油產生的液滴中熒光素的泄漏率相似（約 15% 泄漏），并且在 Fluo-Oil? 135 中產生液滴的情況下保持恒定 3 天。相反，在 24 小時后， Novec? HFE7500 中液滴的泄漏繼續減少并達到 30% 左右。 這種較長孵育時間的較差保留性能可歸因于后一種油的粘度略低，加速了液滴之間更快的分子交換。

結論
對于基于液滴的微流體應用，從一種氟化油類型切換到另一種類型可能會對微流體實驗的過程產生重大影響，尤其是對液滴的有效生成產生重大影響。 在 Novec? HFE7500 和 Fluo-Oil? 135 的情況下，已證實更換這兩種氟化油對實驗條件和結果沒有影響。 當使用 Fluo-Oil? 135 作為連續相時，甚至可以觀察到熒光素在液滴內的更好保留。

氟化油Fluo-Oil? 135 是用于液滴微流體應用的 Novec? HFE7500 的有效替代品。