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2025-01-10 17:05:28硝呋索爾代謝物測定解析
“硝呋索爾代謝物測定解析”是一項專業的生物分析技術,主要用于檢測和分析生物體內硝呋索爾的代謝產物。該技術通過高精度儀器對樣本進行提取、分離、純化和檢測,能夠準確測定硝呋索爾代謝物的種類、濃度和分布,為藥物代謝研究、毒理學評估及臨床診斷提供重要依據。硝呋索爾代謝物測定解析在藥物研發、食品安全及環境監測等領域具有廣泛應用,有助于評估藥物效果、確保食品安全及監測環境污染情況。

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2022-11-10 17:30:37【行業動態】新增!硝呋索爾代謝物檢測!出口歐盟動物源性食品和國內水產品
10月27日,海關總署緊急下達輸歐盟動物源性食品執行新殘留限值標準的通知:各直屬海關:根據歐 盟 (EU ) 2019/1871 法規要求,自 2022 年 11 月28 日起, 動物源性食品中氯霉素、 硝基呋喃類代謝物、孔雀石綠等藥殘的測定限值將執行新的標準. 根據《食品安全法》 的規定, 出口食品生產企業應當保證其出口食品符合進口國 (地區 ) 標準要求?,F就歐盟相關標準和要求通報如下:一、自 2022 年 11 月28 日起,輸歐盟動物源性食品需符合氯霉素測定限值 0.15ug/kg、硝基呋喃代謝物 (增加硝呋索爾代謝物, 共5種) 測定限值 0.5ug/kg、孔雀石綠和隱形孔雀石綠總量測定限值0.5ug/kg 的標準要求。二、根據歐盟 2002/994/EC 法規要求, 輸歐盟養殖水產品、剝殼和/或加工蝦、小龍蝦、腸衣、兔肉、禽肉制品、蛋及蛋制品、蜂產品等動物源性食品,通批批檢測氯霉素和硝基呋喃類代謝物。養殖水產品還應批批檢測孔雀石綠和結晶紫。    ——海關總署(司)局函此次,海關公函中緊急把硝呋索爾代謝物納入了硝基呋喃代謝物中,共5種,并規定其測定限值為0.5μg/kg。緊接著,10月31日,農業部、國家衛健委、國家市場總局聯合緊急發布《水產品中硝呋索爾代謝物殘留量的測定》征求意見稿,這也就意味著,未來硝呋索爾代謝物不但出口產品需要檢測,國內相關水產品等也將加入檢測行列。為此,壇墨質檢快速響應,推出硝呋索爾代謝物檢測配套標準物質。硝呋索爾及其代謝物性質硝呋索爾(nifursol),又稱硝呋柳肼,是繼呋喃唑酮、呋喃西林、呋喃它酮和呋喃妥因之后的文一種硝基呋喃類抗菌藥物。其結構和性質與呋喃唑酮等其它硝基呋喃類藥物相似,原藥在動物組織中代謝快速,但其有毒代謝產物則在動物體內能與蛋白緊密結合,形成穩定的結合態殘留物,可在體內存在相當長時間,具有一定的毒性。硝呋索爾原藥在動物體內的主要代謝產物為3.5-二硝基水楊酸肼(35-dinitrosalicylic acid hydrazideDNSA)和5-硝基-2-糠酸(5-nitro-2-furoicacid),二者均可作為硝呋索爾的殘留標志物。硝呋索爾及其代謝物的結構式如圖所示。標準物質產品推薦(一)固標(二)液體單標(三)液體混標
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2021-11-15 21:22:43茶葉中草甘膦及其代謝物的UPLC-MS/MS測定
草甘膦,又稱農達,是一種廣譜滅生性除草劑,廣泛應用于茶園、果園、玉米田間等農業生產中。隨著草甘膦的廣泛使用,其在茶葉、水果、玉米等植物源食品中殘留量的檢測越來越受到國內外的關注。草甘膦(GLY)及其代謝物氨甲基膦酸(AMPA)均為小分子化合物,具有極性強、易溶于水、難溶于各種有機溶劑等特性,這給常規檢測帶來了極大的困難和挑戰。中檢維康使用CLOVER草甘膦專用柱(貨號:GLY3000)對茶葉中的草甘膦及其代謝物進行處理,使用UPLC-MS/MS測定,當草甘膦及其代謝物加標濃度為80 μg/kg,其回收率在70-100 %,RSD在5 %以內,符合測定標準。準確稱取經粉碎的茶葉樣品1.0 g(精確至0.001g)于50mL離心管中,加100 μL 濃度為10 mg/L的1,2-C13N15草甘膦同位素內標溶液,加入10 mL水,渦旋混合20 min,超聲振蕩10 min,以4000 r/min離心8 min。移取5 mL上清液至15 mL離心管中,加5 mL二氯甲烷,渦旋5 min,以4000 r/min離心4 min,取上清液2.5 mL過CLOVER?草甘膦專用柱(CLOVER?草甘膦專用柱使用前應依次用3 mL甲醇,3 mL水活化),棄去前端幾滴濾液,收集后續濾液。取上述濾液1mL衍生,依次加入1.0 mL 50g/L硼酸鈉溶液,0.5 mL 10 g/L FMOC-Cl,渦旋混合2 min,40 ℃水浴衍生1 h,渦旋1 min,再以8000 r/min離心3 min,上清液過0.22 μm濾膜,上機檢測。
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2024-03-05 17:21:07近紅外光譜解析實用指南
求《近紅外光譜解析實用指南》
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2024-01-17 16:04:12雜交瘤技術應用、優缺點、常見問題解析
雜交瘤技術又稱細胞融合技術,是將兩個或多個細胞融合成一個。 融合后形成的雜交瘤細胞承襲了兩親本細胞的特征。 自發的細胞融合很少發生,當加入一種融合劑,如:聚乙二醇(常用)、仙臺病毒或溶血卵磷脂后,兩種細胞就可發生融合。 首先是質膜互相融合,形成具有兩個或多個核的異核體,細胞進一步分裂時,核互相融合,形成了雜交細胞。  雜交瘤技術優缺點:優點:與傳統的免疫動物方法制備抗體相比,利用雜交瘤技術可以制備出高純度的單抗,并且可以進行單克隆抗體的大量生產。缺點:a.操作步驟繁瑣。b.利用雜交瘤技術生產出的單克隆抗體多為鼠源性,而鼠源性抗體在應用中有諸多問題,例如被人類免疫系統所識別,產生人抗鼠抗體( HAMA)反應、在人體循環系統中很快被清除等。 雜交瘤技術應用:①診斷應用:單克隆抗體在疾病診斷中發揮了重要作用,其優點在于診斷準確且無交叉反應,例如在乙型肝炎及潛伏的乙型肝炎病毒的診斷中,單克隆抗體能顯著減少假陰性的漏診。②治-療載體:單克隆抗體也可作為治-療疾病的載體。通過與抗腫瘤藥物結合,單克隆抗體能在體內選擇性集中攻擊腫瘤細胞,具有靶向性,從而減少對正常組織的損傷并減輕抗-癌藥物的副作用。因此,載藥單克隆抗體被譽為“生物導-彈”。③異種蛋白質問題:目前大多數單克隆抗體為鼠-鼠型,對于人體來說屬于異種蛋白質,容易引起排異反應,限制了其在治-療中的應用。④人-人型單克隆抗體的研究:為了解決排異問題,研究者正在努力研發人-人型單克隆抗體,以利于其在治-療中的廣泛應用。 雜交瘤技術常見問題解析: ①電融合和PEG融合的區別?PEG化學融合是利用聚乙二醇分子能夠改變細胞膜結構的特性來實現細胞融合的過程。聚乙二醇可以使兩個細胞接觸點質膜的脂質分子發生疏散和重組,兩個細胞接觸部位的質膜由于相互親和以及彼此的表面張力作用,從而發生細胞融合。電融合則是先通過高頻交流電壓,使細胞成串珠狀排列,實現點接觸;然后施加方波脈沖,擊穿兩個細胞接觸部位的質膜,質膜脂質分子發生重組,同時由于細胞表面張力作用,完成細胞融合。電融合法比PEG融合法有明顯的優點:細胞融合率高,有利于雜交瘤的篩選;電脈沖擊穿對細胞的損傷小,有利于融合后細胞的生長增殖;可直接觀察融合過程;便于有目的地控制選擇融合條件。 ②為什么要推薦進行2~3輪有限稀釋獲得穩定的雜交瘤細胞株?陽性單克隆細胞的獲得通常進行至少2輪有限稀釋,原因主要考慮兩點。第一,有限稀釋過程中,大多數是通過實驗者在顯微鏡下觀察細胞團狀態來判定是否是單克隆,存在一定的主觀經驗值,至少進行兩輪有限稀釋可以增加判斷的準確性;第二,雜交瘤細胞由兩個細胞融合而成,存在基因的不穩定性,連續2輪有限稀釋,客觀上增加了篩選中細胞培養時間,有利于淘汰不穩定的雜交瘤細胞株。 ③為什么要使用核酸免疫?重組蛋白由于免疫靶向明確、劑量可控等優勢,通常作為動物免疫階段的首-選免疫原。但有些重組蛋白因為表達純化困難,很難大量獲得并用于動物免疫;另外,重組蛋白與天然樣本之間存在或多少的結構差異。而核酸免疫,跳過了蛋白表達純化的過程,成功避開了蛋白生產的難題,通過核酸體內表達的蛋白結構也更加接近天然蛋白,故而可以作為重組蛋白免疫的有效補充手段。但核酸免疫的免疫劑量很難判斷,整體免疫效價也會普遍低于蛋白和多肽免疫。 ④除弗氏佐劑之外,免疫佐劑還有哪些?免疫佐劑是指那些同抗原一起或預先注入機體內能增強機體對抗原的免疫應答能力或改變免疫應答類型的輔助物質。佐劑的免疫生物學作用是增強免疫原性、增強抗體的滴度、改變抗體產生的類型、引起或增強遲發超敏反應等。除經典的弗氏佐劑外,各類不同功能的佐劑也層出不窮,比較常見的有:1)無機佐劑,如磷酸鋁佐劑、氫氧化鋁佐劑;2)生物類佐劑,如以細菌胞壁或產物為主要組成的佐劑;3)具有佐劑活性的細胞因子類,如GSF、IL1、IL2、IFN -γ等;4)人工合成佐劑,如cpG等。 ⑤雜交瘤融合后主克隆接種96孔細胞培養板數量通常是多少?融合后的主克隆細胞接種96孔細胞培養板的數量與融合效率和脾細胞多少有密切關系。PEG化學融合后的主克隆,通常一只小鼠的脾細胞可以接種8-15塊96孔細胞培養板;電融合因為融合效率大大提高,通常一只小鼠的脾細胞可以接種30~50塊96孔細胞培養板。  更多雜交瘤技術開發平臺詳情可以關注:https://cn.sinobiological.com/services/platform/hybridoma-development 義翹神州:蛋白與抗體的專業引領者,歡迎通過百度搜索“義翹神州”與我們取得聯系。
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2022-10-20 11:24:40多重PCR技術要點解析
多重PCR概述多重PCR(multiplex PCR),又稱多重引物PCR或復合PCR,它是在同一PCR反應體系里加上二對以上引物,同時擴增出多個核酸片段的PCR反應,其基本原理與常規PCR相同,區別在于多重PCR反應體系加入一對以上引物,各對引物分別結合在模板相對應部位,最終擴增出一條以上目的DNA片段。多重PCR的特點?高效性:在同一PCR反應管內同時檢出多種基因,或對有多個型別的目的基因進行分型,特別是微量樣本的多基因檢測。?系統性:多重PCR適宜于成組病原體的檢測,如肝炎病毒,腸道致病性細菌,性病,無芽胞厭氧菌,戰傷感染細菌及細菌戰劑的同時偵檢。?經濟簡便性:多種病原體在同一反應管內同時檢出,將大大的節省時間,節省試劑,節約經費開支。多重PCR應用?基因診斷、腫瘤診斷、病原微生物的檢測。?基因分型、連鎖分析。?植物分子育種、基因表達檢測、病蟲害檢測。?病原菌污染檢測。?區域捕獲測序。多重PCR之難多重PCR并不是單純的將多對特異性引物混合成一個體系。多重PCR之所以難,在于多個靶點之間擴增條件不兼容,每個靶點都需要旁邊其他的引物配合。就像是三人兩足游戲一樣,每個靶點成功擴增都是需要綁在一起的兩個人(一對引物)默契配合。而多重PCR就需要所有的選手同時起跑又同時到達,并且所有的選手都達到發揮。多重PCR優化為了達到更好的擴增效果,一般可以通過以下幾個方面進行優化?!粢锏膬灮骸舴磻w系:◆反應條件:◆常見問題解決辦法:多重PCR要求在同一反應體系內對多個位點進行特異性擴增。因而引物間的配對與競爭性擴增均會影響擴增效果。如果能選擇合適的反應體系、反應條件以及更合適的PCR儀,則有望提高多重PCR的擴增效果。所以在進行多重PCR的時候,不應墨守成規,要根據自身實驗情況對實驗條件進行不斷優化,達到擴增效果。
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