- 2025-04-25 14:16:26腫瘤切除手術
- 腫瘤切除手術是一種外科治療方法，旨在通過切除患者體內的腫瘤組織來達到治療目的。手術前需進行詳細的檢查和評估，確定腫瘤的位置、大小和性質。手術過程中，醫生會小心分離并切除腫瘤，同時盡量保留周圍正常組織。術后需進行恢復和監測，以防感染和并發癥。該手術適用于多種類型的腫瘤，是腫瘤治療的重要手段之一，但具體方案需根據患者病情和醫生建議制定。
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腫瘤切除手術資訊
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腫瘤切除手術問答
- 2023-02-15 14:27:47腫瘤疫苗生物學活性評估
- 腫瘤疫苗背景腫瘤疫苗，是一種具有預防和治 療潛力的有吸引力的替代免疫治 療選擇，是近年研究的熱點之一。針對腫瘤相關抗原（Tumor-associated antigen,TAA）或腫瘤特異性抗原 (Tumor specific antigen,TSA) 的疫苗可以特異性地攻擊和破壞抗原過表達的惡性細胞，并由于免疫記憶而實現慢性治 療反應。因此，與其他免疫療法相比，癌癥疫苗提供了特異性、安全性和可耐受的治 療。根據腫瘤抗原的組分，癌癥疫苗大致可以分為四種類型：基于 DNA 的疫苗，基于 RNA 的疫苗，基于多肽的疫苗和基于免疫細胞的疫苗。FDA 批準的首 個個性化腫瘤疫苗 PROVENGE (Sipuleucel-T) 是一種基于免疫細胞的疫苗，用于激素難治性前列腺癌的治 療。除此之外，Moderna，BioNTech 都在布局基于 mRNA 的腫瘤疫苗。圖 1 腫瘤疫苗抗原呈遞平臺示意圖腫瘤疫苗有效性評估方法生物體接種疫苗后，腫瘤抗原被帶到淋巴結，進而激活抗原特異性的 B 細胞和 T 細胞，活化的 B 細胞產生的抗體及活化的效應 T 細胞會使腫瘤內脹并誘導腫瘤細胞死亡。圖 2 腫瘤疫苗誘導的免疫反應示意圖如何有效的評估腫瘤疫苗的有效性是一個非常值得探討的問題，常用的腫瘤疫苗有效性驗證的方法，包括細胞因子檢測、CTL 活性檢測、T 細胞活化標志物檢測、抗體滴度檢測、ADCC 檢測等。1、細胞因子檢測細胞因子是由免疫細胞經過刺激而合成并分泌的小分子蛋白質，在免疫應答中起著非常重要的作用，因此可以通過細胞因子的分泌能力來反應疫苗誘導的細胞免疫的水平。常見的細胞因子有白介素 (IL) 、干擾素 (IFN)、 腫瘤壞死因子 (TNF) 等。下面比較了幾種常見的檢測方法。ELISA 是一種非常經典的細胞因子的檢測方法，例如在王曉東等人發表的關于胃癌疫苗研究的文章中，提到了用 ELISA 的方法檢測接種疫苗后小鼠骨 髓源樹突狀細胞（BMDCs）分泌細胞因子的能力，檢測方法如下：BMDCs 在含有 10ng/mL GM-CSF 和 10ng/mL IL-4 的 X-vivo 15 培養基中培養，37℃下培養 6 天，然后以每孔 5×104 細胞的密度在 96 孔板中接種。以 5μM 或 10μM 的最 終濃度加入疫苗抗原，孵育 24 小時。使用小鼠 TNF-α 和 IL-12 p70 ELISA Ready-SET-Go 試劑組定量培養上清中的 TNF-α 和 IL-12 。首先在 4℃下用捕獲抗體包被 ELISA 板過夜，然后在室溫下依次加入阻斷液、細胞培養上清和檢測抗體，孵育 1h 。 最 后加入終止液和顯色劑，用酶標儀 (BioTek) 在 450nm 處記錄 OD 值。檢測結果如下：從檢測結果可以看出，T7（TLR7 激動劑）的存在可以顯著提升 ML/MB 抗原誘導的免疫反應。圖 3 ELISA 法測定小鼠骨 髓樹突狀細胞 (BMDCs) 分泌TNF-α (a) 和 IL-12 (b) 的水平Ankita Leekha 等人發表的關于 SRAS-COV2 疫苗文章中，提到了用 ELISPOT 的方法評估細胞因子的分泌水平，可以作為參考。具體方法如下：從小鼠中分離脾細胞和肺細胞，使用小鼠 IFNγ ELISpot 基礎試劑盒和小鼠 IL4 ELISpot 基礎試劑盒 (Mabtech, VA, USA) 進行 IFNγ 和 IL4 ELISpot 檢測。在 37℃ 下，在預包被抗體的 ELISpot 板中，用抗原刺激脾細胞和肺細胞，培養 16-18 小時。第二天，洗掉細胞，加入生物素化的檢測抗體。洗板后，加入 1:30000 稀釋的 Extravidi-ALP 偶聯物，室溫孵育 1 小時。洗板后，每孔添加 70μL 顯色液，孵育 20-30min，形成斑點，然后用水清洗，干燥。使用 Cytation 7 (BioTek) 對斑點進行量化。每個點對應一個單獨的細胞因子分泌細胞。檢測結果如下：圖 4 ELIPSOT 方法檢測小鼠脾細胞和肺細胞分泌細胞因子的水平2、CTL 活性檢測疫苗誘導的細胞毒性 T 淋巴細胞 (CTL) 可以直接殺傷腫瘤細胞，起到抗腫瘤的作用，因此可以通過檢測 CTL 的殺傷效應來反應疫苗的效果。常用的檢測細殺傷效應的方法有很多，下表列舉了一些常用的方法。王曉東等人發表的文章中提到了 LDH 檢測，檢測方法如下：從接種疫苗小鼠的脾 臟中分離淋巴細胞（效應細胞）。EAC 腫瘤細胞（靶細胞）與淋巴細胞（效應細胞-靶細胞比例為 50:1）共培養 4h，使用乳酸脫氫 (LDH) 法測定細胞毒性。將培養 4h 后的培養上清加入在 ELISA 板中，室溫下加入底物溶液，孵育 30min。最 后，加入終止液終止反應，并用酶標儀 (BioTek) 在 490nm 處檢測光密度。檢測結果如下：相對于 PBS 對照組來說，T7-MB 組 CTL 細胞具有顯著的殺傷效應。圖 5 LDH 法測定 CTL 介導的 EAC 靶細胞的裂解水平3、抗體滴度及親和力檢測腫瘤疫苗除了可以誘導細胞免疫之外，也可誘導體液免疫，對此可通過對抗體滴度及親和力進行檢測來反應疫苗抗腫瘤的效果，ELISA 是一種非常經典的檢測方法。上述關于胃癌疫苗的文章中通過 ELISA 方法測定小鼠接種疫苗后血清中總 IgG 含量，具體檢測過程如下：小鼠接種疫苗后收集血液樣本，通過 3000g 離心 15 分鐘獲得血清樣本。ELISA 板預先在 4℃ 包被 BSA-MG1 過夜，然后在室溫下依次加載封閉溶液 2h，血清樣品 (1:50 稀釋) 和檢測抗體 1h。最 后，在體系中加入 p-NPP 底物 (Millipore) 和終止液，用酶標儀 (BioTek) 在 405nm 處記錄 OD 值。檢測結果如下：相對于 PBS 對照組來說，T7-MB 組抗體含量明顯上升。圖6 ELISA法測定疫苗誘導的血清抗體水平除此之外，在 Emily C. Gale 等人發表的關于 mRNA 遞送系統及輔劑研究的文章中，通過 ELISA 的方法測定了 mRNA OVA 模式疫苗誘導的 OVA 特異性抗體的絕 對含量及其親和力。具體檢測方法如下：抗體濃度：小鼠接種加強疫苗后，采集血液樣品，血清按照 1:100 000 進行稀釋。采用 anti-OVA mouse IgG1 ELISA (Cayman Chemicals) 試劑，按照試劑廠家的說明進行 ELISA 實驗。使用 Synergy H1 Microplate Reader (BioTek) 在 450nm 處記錄 OD 值。根據標準曲線計算血清抗體濃度，表示 mg/mL。抗體親和性：將 12 個梯度稀釋的血清與恒定濃度標記 HRP 的 anti-OVA 抗體 (3nM) 混合，并在 OVA 抗原包被的板中室溫孵育 2 小時，洗板后用 TMB 底物孵育，用 HCl 停止反應。測定 450nm 處的 OD 值。根據業內發現的單克隆抗體的共同親和力，假設對照抗體的 KD 為 1nM 對實驗組的 KD 值進行統計。這一假設僅影響報告的絕 對 KD 值，而不影響實驗組之間的相對差異。檢測結果如下：pIC 為雙鏈 RNA 結構模擬物，圖E中比較了可溶性的 pIC 和不同納米顆粒遞送系統誘導的絕 對抗體含量，從圖 E 中可以看出 2B 遞送系統誘導的 OVA 特異性抗體含量最 高。從F和G可以看出 2B 遞送系統相對于可溶性 pIC 來說誘導的 IgG 親和力也顯著升高。圖 7 pIC/PBAE NPs 增強體液免疫4、ADCC 檢測疫苗誘導體液免疫產生的抗體能夠捕捉目標抗原，阻斷這個靶分子的功能，也可以引導其他免疫細胞（如巨噬細胞和自然殺傷細胞）殺死表達抗原的靶細胞，在腫瘤治 療中，特別是血液腫瘤中，抗體依賴的細胞介導的細胞毒性作用 (ADCC) 起著關鍵作用，ADCC 常用的檢測方法包括細胞活力檢測、LDH 檢測、工程細胞株、Delfia、RTCA、細胞成像檢測等。王曉東等人發表的關于胃癌疫苗研究的文章中，提到了 LDH 方法檢測 ADCC，檢測方法如下：小鼠接種疫苗后，采集其血清樣本（1:25 稀釋），然后與 EAC 細胞（靶細胞）在 37°C 孵育 30min。使用小鼠 NK 細胞分離試劑盒從正常 BALB/c 小鼠中分離出自然殺傷 (NK) 細胞（效應細胞），與抗體標記的 EAC 細胞以效靶比 50:1 共培養 4 小時。采用 LDH 法 (Promega) 測定細胞毒性，檢測方法與之前提到的 CTL 活性檢測的方法一致。檢測結果如下：相對于 PBS 對照組來說，T7-MB 組產生的抗體具有顯著的殺傷效應。圖 8 LDH 法測定血清抗體介導的 EAC 靶細胞的裂解水平腫瘤疫苗生物學活性檢測解決方案推薦本文介紹了腫瘤疫苗活性檢測的常用方法，包括細胞因子檢測、CTL 活性檢測、抗體滴度及親和力檢測、ADCC 檢測等方法，涉及到了酶標儀、成像系統、流式、RTCA、洗板分液系統等設備。Agilent 細胞分析事業部可以從多個角度為用戶提供從樣品處理，到結果檢測再到數據分析的全面解決方案。
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- 2023-06-25 11:45:31【Leica in Scope課程】前節手術的技術趨勢：術中OCT與3D可視化手術
- 第四期：前節手術的技術趨勢：術中OCT與3D可視化手術課程簡介：來自英國南安普頓大學醫院的David Anderson醫師和來自羅馬尼亞Oculus 眼科診所的Ozana Moraru博士將分享新興技術趨勢如何改變眼前節手術。他們將通過臨床病例和手術視頻討論術中OCT和3D的價值。講者：Mr. David Anderson 高級眼科顧問醫師南安普頓大學醫院 英國Dr. Ozana Moraru眼科醫師歐科路斯眼科診所 羅馬尼亞
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- 2022-12-25 11:02:19脊柱手術中的高級可視化
- 近年來脊柱手術取得了有意義的進展。微創脊柱手術(MISS)技術具有顯著的優勢，有助于大限度地減少手術創傷，改善患者結果，并縮短術后恢復時間。手術顯微鏡，為脊柱手術的可視化質量設定了新的標準。手術顯微鏡提供了優質的光學器件和照明，以及反應靈敏且穩定的落地支架。手術顯微鏡可以為狹窄的腔體深處提供明亮的全聚焦視場。主要經驗醫生在進行后路腰椎融合術時手術顯微鏡的優點：幫助醫生使手術創傷更小。手術顯微鏡的主要特點：簡單易用、連通性、全面可視化、景深大、最 佳照明、圖像質量高和符合人體工學的操作體位。關于手術顯微鏡手術顯微鏡為支持微創脊柱手術(MISS)和諸如后路腰椎融合術、后路腰椎椎體間融合術等手術提供了獨特的優勢。手術顯微鏡具有出色的光學性能和大景深，讓醫生看到所需的細節。無需反復尋找重要細節或不斷重新聚焦。手術顯微鏡的支架采用輕量化設計且功能豐富多樣，可快速設置，能提高手術室的工作效率。在脊柱手術中使用手術顯微鏡給醫生留下了什么印象？手術顯微鏡是一個非常好的設備，易于使用，易于操作。對于手術室中的操作人員來說，該機器的設計使其簡單易用。例如，觸摸屏非常方便，簡單易用，也可以將它輕松連接到手術室的上方屏幕。在使用手術顯微鏡的過程中，醫生體會到了哪些優勢？醫生使用手術顯微鏡時可以清楚地看到受損側的退化神經根，可以擁有很好的視野，在手術側非常深入地聚焦。可以在解剖層看到清楚的區別?？梢钥吹近S色韌帶，神經根，硬膜囊，鞘囊，可以在使用焦距和放大倍數的同時清晰地區分它們。手術顯微鏡的哪一點最吸引醫生？對醫生來說手術顯微鏡主要的好處是，醫生可以將光線很好地、深入的帶入手術視野中，可以在不改變生理位置的情況下改變顯微鏡的位置，這樣可以更加輕松地對患者進行手術。使得手術創傷更小，所以對患者更有益處。手術顯微鏡的其它優勢手術顯微鏡進入手術室也非常人性化，側屏幕，新的平板屏幕，具有非常高的圖像質量，讓手術室里的每個人都可以觀看手術。
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- 2022-12-06 13:04:21探秘腫瘤微環境，原位“看透”細胞因子
- 細胞因子是腫瘤微環境（Tumor Microenvironment,TME）中細胞通訊的關鍵介質，在癌癥的發生、發展、治 療和預后等多個方面發揮重要作用。在過去的 40 年中，細胞因子和細胞因子受體作為癌癥靶點或癌癥治 療方法得到了廣泛的研究。目前公認的臨床前治 療策略為增強干擾素和白細胞介素（包括 IL-2 ，IL-7 ，IL-12 和 IL-15 ）的生長抑 制和免疫刺激作用，或抑 制細胞因子（如 TNF ，IL-1β 和 IL-6 ）的炎癥和促進腫瘤的作用[1]。圖 1 . 細胞因子在腫瘤微環境中的作用特定細胞因子的表達也與腫瘤細胞的高存活率和高轉移性密切相關。其中促炎細胞因子 IL-6 和 IL-8 與多種癌癥相關，包括淋巴瘤、黑色素瘤、乳腺癌、前列腺癌和結腸直腸癌等 [2,3]。因此，分析細胞因子的表達是一種重要的診斷工具和預測癌癥預后的關鍵因素。非放射性的 RNA 原位雜交技術（ViewRNA ISH）是一種高靈敏度的檢測細胞因子表達的有效方法，并且可以對 1 至 4 個 mRNA 目標進行多重分析。檢測原理如下圖所示：圖 2 . ViewRNA ISH 檢測原理安捷倫BioTek Cytation 5 多功能細胞成像微孔板檢測系統，可容納多達四個熒光通道同時成像，快速并出色地成多色熒光成像。儀器配備的高內涵分析軟件可自動計算細胞內 RNA 的表達水平。Cytation 5 活細胞成像工作站結合ViewRNA ISH，為細胞因子研究提供了一種高效率、高靈敏度和可重復的檢測方法。實驗案例分享 實驗一．細胞因子mRNA的成像和分析 為研究細胞因子mRNA 在不同營養條件下的表達情況，設置兩組對照實驗。陽性對照細胞培養于完全培養基中，而陰性對照細胞經過 18 小時的血清饑餓處理。隨后加入 ViewRNA 探針以標記 IL-6 、IL-8 和 ACTB mRNA ，在Cytation 5 上分別使用 RFP 、GFP 、Cy5 和 DAPI 通道對探針進行成像完成 ISH 細胞分析。圖像結果表明：細胞因子mRNA 的表達在營養匱乏的條件下會顯著降低。圖 3 . 陽性和陰性對照組成像。HCT116 放大 20 倍圖像作為（ A ）陽性對照和（ B ）陰性對照。MDA-MB-231 細胞放大 40 倍的圖像作為（ C ）陽性對照和（ D ）陰性對照。藍色：DAPI 染色的細胞核；綠色：標記 IL-8 mRNA ；橙色：標記 IL-6 mRNA ；紅色：標記 ACTB mRNA 。接下來為了定量分析細胞因子表達，首先在 Cytation 5 的 DAPI 通道下進行細胞核計數，以確定每孔的細胞數量（圖 4A ）。然后分別在GFP 、RFP 通道進行細胞因子探針（ IL-6 或 IL-8 ）的熒光信號分析（圖 4B ）。通過細胞熒光信號的比率評估不同實驗條件下的細胞因子表達（圖 5 ）。圖 4 . 每個細胞的熒光信號分析。( A ) 使用 Agilent-BioTek Gen5 軟件進行細胞分析圈選出 DAPI 標記的細胞核；( B ) 熒光標記的 IL-8 信號的圖像分析。如圖 5 所示，使用 ViewRNA ISH 和 Cytation 5 這一組合準確的量化了細胞內 IL-6 和 IL-8 mRNA 的表達。圖 5 . MDA-MB-231 細胞中 IL-8 表達和 HCT116 細胞中 IL-6 表達，并以細胞數目進行校正。 實驗二．誘導細胞因子 mRNA 的表達 使用不同劑量的 IL-1β 刺激 DU145 細胞，以分析細胞因子的 mRNA 的表達（圖6）。圖 7 結果顯示：雖然 IL-6 和 IL-8 的 mRNA 表達增加，但 IL-8 的表達變化更為顯著，這與先前研究結果一致[4]。IL-1β 的最 高劑量下，這兩種細胞因子的表達減少則是由于細胞毒性。這驗證了該檢測方法的可行性與穩定性。圖 6 . 不同濃度的 IL-1β 刺激下的 IL-6 、IL-8 和 ACTB 熒光 mRNA 探針信號 ( A ) 0 ng/mL；( B ) 0.02 ng/mL ；0.128 ng/mL；( D ) 0.8 ng/mL。藍色：DAPI染色的細胞核；綠色：標記的IL-8 mRNA；橙色：標記的 IL-6 mRNA ；紅色：標記的 ACTB mRNA 。圖 7 . 不同濃度的 IL-1β 刺激下 DU145 細胞中 IL-6 和 IL-8 mRNA 的表達。 實驗三．抑 制細胞因子 mRNA 的表達 研究表明絲裂原活化蛋白激酶（ MAPK ）可調節 IL-8 ，并證明用 MAPK/ERK 抑 制劑 U 0126 治 療可減少 DU145 和 MDA-MB-231 細胞中的炎癥細胞因子[4,5]。為了確認這一現象并驗證 ViewRNA ISH 和 Cytation 5 這一組合的能力，將不同濃度的 U 0126 加入到每種細胞類型中孵育 30 分鐘。然后用 1 ng/mL 的 IL-1β 刺激 DU145 細胞達 3 小時，而 MDA-MB-231 細胞未被刺激。使用 GFP 和 RFP 通道進行細胞計數和圖像分析以評估在 U 0126 治 療后 IL-8 和 IL-6 細胞因子 mRNA 的表達。采集的圖像（圖 8 ）和計算的熒光信號強度 （圖 9 ）證實了 U 0126 的抑 制作用。此外，也驗證了該方法的靈敏度，可以準確識別給予抑 制劑后 mRNA 的表達變化。圖 8. U 0126 抑 制 IL-8 mRNA 的表達。圖像顯示了在不同濃度的 U 0126 處理后 ( A-E ) MDA-MB-231 細胞內 IL-6 、IL-8 和 ACTB 熒光 mRNA 探針信號；( F-J ) 為 DU145 細胞。藍色：DAPI 染色的細胞核；綠色：標記的 IL-8 mRNA ；橙色：標記的 IL-6 mRNA ；紅色：標記的 ACTB mRNA 。圖 9 . U 0126 治療后 IL-8 和 IL-6 mRNA 在 MDA-MB-231 和 DU 145 細胞中的表達結 語ThermoFisher 的 ViewRNA ISH 細胞分析試劑盒和探針提供一種靈敏的方法來檢測 mRNA 表達。該方法在安捷倫BioTek Cytation 5 細胞成像系統的加持下得以更更快地采集多熒光通道的圖像，并更精 準的計算出每一個細胞的熒光信號強度。這種檢測、成像和分析的完 美結合提供了一種靈敏、靈活和高通量的方法用以檢測細胞因子 mRNA 的表達。參考文獻：[1] Propper DJ, Balkwill FR. Harnessing cytokines and chemokines for cancer therapy. Nat Rev Clin Oncol. 2022 Apr;19(4):237-253.[2] Kampan NC, Xiang SD, McNally OM, Stephens AN, Quinn MA, Plebanski M. Immunotherapeutic Interleukin-6 or Interleukin-6 Receptor Blockade in Cancer: Challenges and Opportunities. Curr Med Chem. 2018;25(36):4785-4806.[3] Vecchi L, Mota STS, Zóia MAP, Martins IC, de Souza JB, Santos TG, Beserra AO, de Andrade VP, Goulart LR, Araújo TG. Interleukin-6 Signaling in Triple Negative Breast Cancer Cells Elicits the Annexin A1/Formyl Peptide Receptor 1 Axis and Affects the Tumor Microenvironment. Cells. 2022 May 20;11(10):1705.[4] Kooijman R, Himpe E, Potikanond S, Coppens A. Regulation of interleukin-8 expression in human prostate cancer cells by insulin-like growth factor-I and inflammatory cytokines. Growth Horm IGF Res. 2007 Oct;17(5):383-91.[5] Chelouche-Lev D, Miller CP, Tellez C, Ruiz M, Bar-Eli M, Price JE. Different signalling pathways regulate VEGF and IL-8 expression in breast cancer: implications for therapy. Eur J Cancer. 2004 Nov;40(16):2509-18.
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- 2024-07-04 14:33:073D打印牙科專用樹脂：種植手術導板樹脂全面解析
- 種植手術導板樹脂是一種用于牙科和醫療領域的光固化3D打印材料，它能夠幫助醫生在手術中準確定位種植體的位置、深度和角度，從而提高手術的成功率和種植體的長期穩定性。 種植手術導板樹脂具有優異的生物相容性和高機械強度，支持高速成型，同時其高透明度、易于拋光、低吸水率的特點都可以滿足牙科應用的需求。 01產品特點 1. 生物相容性 導板樹脂必須滿足生物相容性的標準，以確保不會在人體內部引起不良反應。 2.高機械強度 導板樹脂通常具有較高的機械強度，包括彎曲強度和抗沖擊強度，這使得它能夠承受一定的外力而不發生斷裂，是制作種植手術導板等需要高強度應用場景的理想材料。 3.低吸水率 導板樹脂材料具有較低的吸水率，在較為濕潤的口腔環境中，依然能保持模型的尺寸穩定性。 4.易于拋光 導板樹脂表面光滑，易于進行拋光處理，以達到更高的精度和美觀度，對于口腔科應用尤為關鍵。 5.耐高溫蒸汽滅菌 材料能夠耐受高溫蒸汽滅菌處理，保證在臨床使用前的無菌要求。 02產品應用 正畸導板、手術導板、功能性保持器、頜墊、咬合板、X光導板、其他正畸附件 03產品參數近年來，基于3D打印技術開發的數字化定制齒科解決方案在在口腔診療領域被廣泛應用。導板樹脂的應用過程簡單可分為“數據采集、診斷性分析、種植體三維設計、導板結構設計、導板數據輸出、導板打印、導板引導下實施手術”等步驟。使用牙科導板樹脂進行3D打印得到的模型，精度更高，尺寸穩定性更好，可以提高在植入手術中種植體的植入位置、方向和角度的精確性，且可以采用高壓蒸汽消毒，提高手術的安全性，避免損傷重要結構，可以很大程度上改善患者的就醫體驗。
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