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2025-06-04 11:23:14離子交換色譜柱
離子交換色譜柱是一種基于離子交換原理進(jìn)行分離純化的色譜柱。它利用固定相中的離子交換樹脂與流動相中的離子進(jìn)行可逆交換,根據(jù)離子間的親和力差異實(shí)現(xiàn)物質(zhì)的分離。離子交換色譜柱在化學(xué)分析中廣泛應(yīng)用于水質(zhì)分析、藥物分離、蛋白質(zhì)純化等領(lǐng)域,具有高效、選擇性好、操作簡便等優(yōu)點(diǎn)。

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2023-02-21 16:13:51為什么我們要關(guān)心色譜柱內(nèi)徑?
      相信很多色譜分析員都知道,改變色譜柱內(nèi)徑將對許多變量產(chǎn)生直接影響,包括峰高、信噪比、平均柱效、樣品載量、對強(qiáng)注射溶劑的敏感性、壓力、分析物保留次、溶劑用量和/或液體廢物的產(chǎn)生等多方面問題。市面上的液相色譜柱的內(nèi)徑有4.6 毫米、3.0 毫米、2.1 毫米等等多種選擇,那么,為什么會有這么多內(nèi)徑規(guī)格呢,下面恒譜生帶您了解。一:內(nèi)徑對柱色譜有什么影響?       在柱色譜法中,樣品物質(zhì)在流動相的幫助下穿過柱子。它們根據(jù)與固定相的相互作用進(jìn)行分離,從而產(chǎn)生不同的保留時間。換句話說,可以根據(jù)流動相和固定相之間相互作用的類型以及它們通過色譜柱所需的時間來分離和檢測分子。那么,柱徑如何符合方程式的呢?可以想象,更大的直徑使流動相更容易通過。相反,較窄的列意味著這樣做需要更長的時間。可以理解為這對敏感性有連鎖反應(yīng),花在色譜柱上的時間越少意味著靈敏度越低,而時間越長則靈敏度越高。因此,較寬的直徑通常會導(dǎo)致較低的靈敏度,而較窄的直徑則與較高的靈敏度相關(guān)。其實(shí)樣本量也會有影響,較寬的色譜柱需要更大的樣品和更多的溶劑才能進(jìn)行分析,而窄的色譜柱可以使用較小的樣品和較少的溶劑作為流動相。       當(dāng)然,選擇色譜柱并不是只有內(nèi)徑這一種因素,色譜柱的長度和它們能夠承受的壓力也可能不同。從長度開始,這可以產(chǎn)生與直徑類似的效果。較短的色譜柱可縮短分析時間從而降低靈敏度。而較長的色譜柱會增加分析時間并改善結(jié)果。基于以上所述,很顯然長而窄的色譜柱會提供更加優(yōu)越的結(jié)果,因?yàn)樗鼤黾臃治鰰r間、提高靈敏度并且不需要更大的樣品。但是,推動流動相通過色譜柱需要更大的壓力。色譜柱只能承受一定程度的壓力,而泵需要能夠提供足夠的壓力,因此在選擇時也需要考慮這一點(diǎn)。在泵的出口和進(jìn)樣閥之間可以安裝在線過濾器,是能夠用來過濾流動相中的雜質(zhì)和固體顆粒,保護(hù)液相系統(tǒng)的正常運(yùn)行的一種過濾型色譜耗材。在液相色譜系統(tǒng)中,恒譜生在線過濾器可以很大程度上地減少泵、混合器和管路在流動相中輸送過程中所產(chǎn)生的堵塞、損壞儀器等情況出現(xiàn)。二:為什么要使用不同直徑的色譜柱?       有兩個主要優(yōu)勢:其一是減少流動相消耗,其二是減少峰體積。如果將流速調(diào)整為恒定線速度,如HPLC柱徑改變時保留時間應(yīng)相同,因此樣品運(yùn)行時間將保持不變。如果運(yùn)行時間相同且流速降低,則將使用較少的流動相。峰體積(以體積表示的峰寬)隨著色譜柱橫截面積的減小或直徑變化的平方而下降。這轉(zhuǎn)化為成比例的更高的峰,假設(shè)相同質(zhì)量的樣品可以加載到色譜柱上,這可能是正確的,也可能不是正確的。因此,假設(shè)注入相同質(zhì)量的樣品,從 4.6 毫米內(nèi)徑的色譜柱換成 2.1 毫米的色譜柱應(yīng)該會將峰寬減少五倍,并將峰高增加相同的量。       當(dāng)柱直徑發(fā)生變化時,對流速進(jìn)行必要的改變以保持恒定的線速度是相當(dāng)簡單的。減小柱徑有助于節(jié)省溶劑和提高檢測限。但是對于較小直徑的色譜柱,可能會觀察到系統(tǒng)性能的下降。從故障排除的角度來看,很容易將系統(tǒng)性能不佳歸咎于色譜柱本身,而真正的罪魁禍?zhǔn)卓赡苁?LC 系統(tǒng)的柱外體積。對柱外效應(yīng)的相對不敏感是填充直徑 5 μm 顆粒的4.6 mm × 150mm 色譜分析柱可能在未來許多年內(nèi)仍然是常規(guī) LC 工作的主力色譜柱的原因之一。       今天恒譜生分享的知識先到這啦,希望對您的工作有所幫助!
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2017-05-18 00:41:54離子交換色譜柱和離子排阻色譜柱分離物質(zhì)原理的區(qū)別
 
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2023-01-10 13:36:08青出于藍(lán),更勝一籌 | InfinityLab Poroshell 120 Aq-C18 極性保留色譜柱
你是否正面臨著大量化合物分析的挑戰(zhàn)?你是否想開發(fā)同時保留極性和非極性化合物的分離方法?你是否在尋找一款色譜柱,在分析物保留和通量之間平衡?全新 Agilent InfinityLab Poroshell 120 Aq-C18 色譜柱橫空出世,反相模式下使用 100% 水性流動相大幅提高強(qiáng)極性化合物的保留性能,兼顧通量和保留。Agilent InfinityLab Poroshell 120 系列色譜柱,多年來一直是追求效率的分析工作者的利器。除了推出了粒徑為 1.9 μm 和 4 μm 的填料,安捷倫還不斷增加了 Poroshell 120 固定相類型,進(jìn)一步拓展了應(yīng)用范圍。目前 Poroshell 120 系列用于小分子化合物分離的色譜固定相有 3 種粒徑、20 種固定相(包括本次新品 Poroshell 120 Aq-C18)。InfinityLab Poroshell 120 Aq-C18 色譜柱能夠:提高極性化合物的保留兼容 100% 水性流動相無需擔(dān)心固定相塌陷或去濕問題批次間高重現(xiàn)性可在所有分析型 HPLC 和 UHPLC 系統(tǒng)間擴(kuò)展如果您使用普通 C18 色譜柱,在分析方法開發(fā)/確認(rèn)階段遇到如下問題:化合物保留、分離和峰型有待改善待測組分極性跨度大高水或者純水條件下化合物保留時間漂移安捷倫 InfinityLab Poroshell 120 Aq-C18 將是您的理想之選!
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2017-03-25 11:36:35離子交換色譜柱分離極弱酸陰離子時 怎么加快出峰
 
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2022-03-08 11:51:31全新MaxPeak Premier SEC色譜柱隆重上市
全新MaxPeak Premier SEC色譜柱隆重上市,助力新型抗體藥物分析近日,沃特世公司隆重推出MaxPeak Premier SEC系列色譜柱。這款色譜柱專為ADC/雙抗分析設(shè)計(jì),只需簡單的流動相,就能同時分離聚合物和片段。圖1. MaxPeak Premier SEC系列色譜柱MaxPeak Premier SEC采用專 利的Premier柱管,這是沃特世首次將該技術(shù)應(yīng)用于大分子分析的產(chǎn)品線。結(jié)合新型PEO鍵合相填料表面修飾,可大大減少次級作用,僅需較少的鹽即可得到對稱峰形。這一特點(diǎn)將使SEC的方法開發(fā)更簡單,即單一 流動相即可滿足不同樣品的分析需求,有利于建立一個高效的SEC分析平臺。圖2. 不同流動相中蛋白混合標(biāo)準(zhǔn)品分離色譜圖(A: MaxPeak Premier SEC色譜圖;B: 傳統(tǒng)SEC色譜圖)。針對ADC/雙抗的分子特性,MaxPeak Premier SEC對填料的孔徑進(jìn)行了優(yōu)化,孔徑分布更加合理,使ADC/雙抗的聚合物及片段分析都有了明顯的改善。圖3. MaxPeak Premier SEC分析ADC/雙抗的對比色譜圖。
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