上海富衡 | 內皮專用培養基：血管內皮細胞研究的得力助手
一、內皮專用培養基的組成與功能
基礎培養基框架：內皮專用培養基常以 M199、DMEM 或 F - 12 等作為基礎培養基。M199 含有豐富的營養成分，包括多種氨基酸、維生素和無機鹽，能為內皮細胞提供廣泛的物質基礎，滿足其多樣的代謝需求。DMEM 則具有較高的葡萄糖含量，為內皮細胞旺盛的能量代謝提供充足 “燃料”。F - 12 培養基富含微量元素，有助于維持內皮細胞內復雜的生理生化反應平衡。這些基礎培養基構成了內皮細胞生長的基本框架。
生長因子與細胞因子：為模擬體內微環境對內皮細胞生長的調控，內皮專用培養基中添加了特定的生長因子與細胞因子。血管內皮生長因子（VEGF）是其中關鍵的一員，它能夠促進內皮細胞的增殖、遷移，誘導血管生成，對維持內皮細胞的血管生成能力至關重要。成纖維細胞生長因子（FGF）同樣不可或缺，它可刺激內皮細胞的分裂與存活，增強細胞的活力。此外，表皮生長因子（EGF）也能參與調節內皮細胞的生長與分化過程，共同助力內皮細胞保持良好的生長態勢。
血清與替代物：傳統的內皮專用培養基常添加一定比例（如 5% - 20%）的胎牛血清（FBS）。FBS 富含多種營養成分和生長調節因子，能有效促進內皮細胞的生長。然而，血清成分復雜且批次間存在差異，可能影響實驗結果的穩定性。因此，近年來無血清或低血清的內皮專用培養基逐漸興起，它們使用化學定義明確的替代物取代部分或全部血清。這些替代物不僅能提供細胞生長所需的營養，還能減少批次差異帶來的影響，使實驗結果更具重復性和可靠性。
其他補充成分：為維持內皮細胞的正常生理功能，培養基中還添加了一些其他成分。例如，肝素可抑制平滑肌細胞的生長，選擇性促進內皮細胞生長，同時它還能與 VEGF 等生長因子結合，增強其生物學活性。谷氨酰胺作為細胞代謝的重要氮源，參與多種代謝途徑，為內皮細胞的生長和修復提供必要的物質基礎。此外，抗氧化劑如維生素 C、維生素 E 等可清除細胞代謝過程中產生的自由基，保護內皮細胞免受氧化損傷。
二、使用內皮專用培養基的注意事項
儲存與穩定性：內皮專用培養基應嚴格按照產品說明儲存，一般需置于 2 - 8℃環境中，避免冷凍。冷凍會導致培養基中的蛋白質變性、生長因子失活以及其他成分的物理化學性質改變，嚴重影響培養基的性能。同時，要注意培養基的保質期，在有效期內使用。開啟后的培養基應盡快用完，若需保存，應密封并在短時間內使用，防止微生物污染和成分降解。
培養條件適配：使用內皮專用培養基培養內皮細胞時，需精準控制培養環境。溫度應恒定在 37℃，模擬人體體溫，這是內皮細胞生長的最適溫度，有利于細胞內各種酶促反應的正常進行。氣體環境方面，5% CO?與 95% 空氣的混合比例至關重要，CO?用于維持培養基的 pH 值在 7.2 - 7.4 之間，適宜的 pH 環境對內皮細胞的生長和代謝活動起著關鍵作用。此外，培養箱內的濕度應保持在較高水平，以防止培養基蒸發導致成分濃縮，影響細胞生長環境的穩定性。
細胞接種與觀察：在接種內皮細胞時，要確定合適的接種密度。密度過低，細胞間相互作用不足，可能導致細胞生長緩慢甚至凋亡；密度過高，則會使營養競爭加劇，代謝廢物積累過快，影響細胞的正常生長。一般每平方厘米接種 5000 - 10000 個內皮細胞較為適宜，但具體密度需根據細胞來源和實驗目的進行調整。接種后，需定期使用倒置顯微鏡觀察細胞的生長狀態，包括細胞的形態、貼壁情況、增殖速度等。正常的內皮細胞呈典型的鋪路石樣形態，緊密貼壁生長。若發現細胞形態異常、貼壁不牢或生長速度明顯改變，應及時檢查培養基的質量、培養條件以及是否存在污染等問題。
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