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2025-05-17 05:04:37激光共聚焦
激光共聚焦是一種高精度聚焦技術,利用激光束通過透鏡系統實現微小光斑的聚焦。其基本原理是通過調整透鏡組合和激光參數,使激光能量高度集中于焦點處,達到高精度加工或測量的目的。激光共聚焦廣泛應用于材料加工、顯微成像、科學研究等領域,具有高精度、高效率、非接觸式加工等優勢,是現代科技中不可或缺的重要技術。

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2023-08-21 11:50:20激光共聚焦熒光顯微鏡 活體熒光物質檢查
激光共聚焦顯微鏡,簡稱CLSM(Confocal Laser Scanning Microscopy),是一種利用激光共振效應進行成像的顯微鏡。它通過使用激光束掃描樣品的不同層面,將所得到的圖像合成成一幅清晰的三維圖像。與傳統顯微鏡相比,激光共聚焦顯微鏡具有更高的分辨率和更強的穿透能力,可以觀察到更加細微的結構和更深層次的物質。在活體熒光物質的檢查中,激光共聚焦顯微鏡發揮了重要的作用。通過標記活體細胞或組織的特定結構或分子,激光共聚焦顯微鏡可以實時觀察到這些結構或分子的活動和分布情況。在生物醫學領域,它可以用于觀察細胞的生長、分裂和死亡過程,研究細胞信號傳導和分子交互作用等。在藥物研發中,它可以用于觀察藥物在活體細胞或組織中的分布情況,評估藥物的療效和毒性。此外,在神經科學領域,激光共聚焦顯微鏡可以用于觀察神經元的活動和連接,揭示大腦的工作機制。 NCF950激光共聚焦顯微鏡較寬場熒光顯微鏡的優點:l 能夠通過熒光標本連續生產薄(0.5至1.5微米)的光學切片,厚度范圍可達50微米或更大。(主要優點)l 控制景深的能力。l能夠從樣品中分離和收集焦平面,從而消除熒光樣品通常看到的焦外“霧霾",非共焦熒光顯微鏡下無法檢測到。(最重要的特點)l  從厚試樣收集連續光學切片的能力。l 通過三維物體收集一系列圖像,用于二維或三維重建。l收集雙重和三重標簽,精確的共定位。l 用于對在不透明的圖案化基底上生長的熒光標記細胞之間的相互作用進行成像。l  有能力補償自發熒光。 耐可視共聚焦成像效果圖                                                          尼康共聚焦成成像效果圖NCF950激光共聚焦顯微鏡應用,共聚焦顯微鏡在以下研究領域中應用較為廣泛:1、細胞生物學:細胞結構、細胞骨架、細胞膜結構、流動性、受體、細胞器結構和分布變化、細胞凋亡;2、生物化學:酶、核酸、FISH、受體分析3、藥理學:藥物對細胞的作用及其動力學;4、生理學:膜受體、離子通道、離子含量、分布、動態;5、遺傳學和組胚學:細胞生長、分化、成熟變化、細胞的三維結構、染色體分析、基因表達、基因診斷;6、神經生物學:神經細胞結構、神經遞質的成分、運輸和傳遞;7、微生物學和寄生蟲學:細菌、寄生蟲形態結構;8、病理學及病理學臨床應用:活檢標本的快速診斷、腫瘤診斷、自身免疫性疾病的診斷;9、生物學、免疫學、環境醫學和營養學。NCF950激光共聚焦顯微鏡配置NCF950激光共聚焦配置表激光器激光405 nm、488 nm、561 nm、640 nm探測器波長:400-750nm,探測器:3個獨立的熒光檢測通道;1個DIC透射光檢測通道掃描頭最大像素大小:4096 x 4096 掃描速度:2 fps(512 x 512像素,雙向),18 fps(512 x 32像素,雙向),圖像旋轉: 360°掃描模式X-T, Y-T, X-Y, X-Y-Z, X-Y-Z-T針孔無級變速六邊形電動針孔;調節范圍:0-1.5毫米共焦視場φ18mm內接正方形圖像位深12bits配套顯微鏡NIB950全電動倒置顯微鏡光學系統NIS60無限遠光學系統(F200)目鏡(視野)10×(25),EP17.5mm,視度可調-5~+5,接口Φ30觀察鏡筒鉸鏈式三目觀察鏡筒,45度傾斜,瞳距47-78mm,目鏡接口Φ30,固定視度;1)目/攝切換:(100/0,50/50,0/100);2)目視/關閉目視/可調焦勃氏鏡NIS60物鏡10×復消色差物鏡,NA=0.45 WD=4.0 蓋玻片=0.1720×復消色差物鏡,NA=0.75 WD=1.1 蓋玻片=0.1760×半復消色差物鏡,NA=1.40 WD=0.14 蓋玻片=0.17 油鏡100×復消色差物鏡,NA=1.45 WD=0.13 蓋玻片=0.17 油鏡物鏡轉換器電動六孔轉換器(擴展插槽),M25×0.75聚光鏡6孔位電動控制:NA0.55,WD26;相襯(10/20,40,60選配)DIC(10X,20X/40X)選配.空孔照明系統透射柯拉照明,10W LED照明;落射照明:寬場光纖照明6孔位電動熒光轉盤(B,G,U標配);電動熒光光閘;中間倍率切換手動1X,1.5X、共焦切換機身端口分光比:左側:目視=100:0;右側:目視=100:0;平臺電動控制:行程范圍130 mm x100 mm (臺面325 mm x 144 mm )最大速度:25mm/s;分辨率:0.1μm - 重復精度:3μm。機械可調樣品夾板調焦系統同軸粗微動升降機構,行程:焦點上7下2;粗調2mm/圈,微調0.002mm/圈;可手動和電動控制,電動控制時,最小步進0.01um;DIC插板10X,20X,40X插板;可放置于轉換器插槽;選配控制搖桿,控制盒,USB連接線軟件軟件:NOMIS Advanced C圖像顯示/圖像處理/分析2D/3D/4D圖像分析,經時變化分析,三維圖像獲得及正交顯示,圖像拼接,多通道彩色共聚焦圖像
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2018-11-30 12:35:08激光共聚焦掃描顯微鏡聚焦掃描問題?
激光共聚焦掃描顯微鏡在在焦平面(X-Y)聚焦時是一個點,可是它是移動什么使它能夠進行線掃描的呢(即按照一條一條的線掃描,然后得到樣品整個表面的結構信息)?還有進行三維重建時,Z軸的移動是通過什么完成的呢?有些資料里面顯示聚光鏡是裝在音叉上面的,這... 激光共聚焦掃描顯微鏡在在焦平面(X-Y)聚焦時是一個點,可是它是移動什么使它能夠進行線掃描的呢(即按照一條一條的線掃描,然后得到樣品整個表面的結構信息)?還有進行三維重建時,Z軸的移動是通過什么完成的呢?有些資料里面顯示聚光鏡是裝在音叉上面的,這里的音叉起到的作用又是什么?求解釋,謝謝! 展開
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2018-12-02 18:42:43哪里有紫外激發的激光共聚焦熒光顯微鏡
 
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2020-04-09 14:13:23有望1分鐘內完成腫瘤活檢 | 《NATURE》子刊發表活體熒光內窺式激光共聚焦成像技術在診斷口/咽/食道癌上的新技術
       一些暴露在體表外的上皮組織腫瘤導致的癌癥,如口腔癌、口咽癌和食道癌,相較于其他組織癌癥更容易通過觀察和鑒別粘膜表面的可見變化進行篩查。但是根據美國國家癌癥研究所的數據顯示,只有29%的口腔癌和口咽癌和19%的食道癌是在癌癥早期發現的。對于非轉移性腫瘤,5年生存率分別為83.7%(口腔癌和口咽癌)和45.2%(食管癌);而轉移性腫瘤的5年生存率則分別只有39.1%和4.8%。手術邊緣殘留腫瘤的存在也會產生負面影響,這說明:目前臨床的肉眼判斷結合活檢為基礎的組織病理學診斷還不能夠達到良好的早期診斷目的。       早期發現腫瘤和術后檢查殘余腫瘤的準確性是直接關系到癌癥復發率和患者生存率的預后因素。美國紀念斯隆-凱特琳癌癥ZX的Thomas Reiner團隊利用DNA修復酶PARP1作為癌癥細胞的靶向高對比度標記物,結合OptiScan公司的ViewnVivo活體熒光內窺式激光共聚焦成像技術,發明了一種快速、靈敏的活檢手段,應用于早期上消化道上皮性腫瘤的手術邊緣評估。該項研究于2020年3月發表在《nature》子刊《biomedical engineering》上。圖1. PARPi-FL應用于新鮮組織的共聚焦顯微成像具有與組織切片同樣的清晰度        PARPYZ劑奧拉帕尼是獲得FDA批準的藥物,PARPi-FL是該類YZ劑的熒光標記類似物,因其對PARP1具有高度的親和力和特異性,可作為PARP1的靶向顯像劑。PARPi-FL是一種細胞穿透成像劑,在沒有與機體內細胞進行靶向結合的情況下可被快速代謝清除。與其他核染色活性染料相比,PARPi-FL不插入DNA,而是可逆地與PARP1結合,PARP1作用于DNA鏈斷裂,不具有致突變性。前人利用靜脈注射PARPi-FL后證明其可作用于全身和細胞水平上高對比度異種移植成像。并且,PARPi-FL的組織穿透性使其能夠替代靜脈注射作為局部藥物使用,應用小劑量的PARPi FL即可立即成像。圖2. PARP1作為腫瘤標志物具有很強的特異性和標志物信號強度       與組織深層深層和上皮相比,腫瘤內PARP1陽性區域明顯高于上皮(5.0%±1.9%,P = 0.03)和組織深層(0.9%±0.5%,P = 0.02)(圖2b)。利用viewnvivo從組織表面垂直斷層掃描的結果表面,深層的影像也可十分清晰捕捉(圖2c)       Thomas團隊在對PARP1在食管癌中的表達研究中發現,包括腺癌和鱗狀細胞癌(T1-T3期)在內的一些腫瘤組織,PARP1表達水平均高于正常上皮和粘膜下深層組織,表明正常組織和腫瘤組織之間存在明顯的定量差異。PARP1表達增加導致PARPi-FL攝取增加,這個增加的比例在腫瘤中高于正常組織20倍。研究人員對比了多個動物模型,發現PARP1表達比例Z低的是小鼠模型,但即使這樣,小鼠模型中PARP1在腫瘤中的PARPi-FL信號也比在正常食管中高出了6倍。這些數據表明,用上述方式在食管中進行高對比度無創內鏡成像是可行的。圖3. PARPi-FL共聚焦影像活檢在臨床上的應用       為了進行PARPi-FL的人體成像,讓經組織病理學確診的口腔鱗狀細胞癌患者用含PARPi-FL的溶液漱口后,使用多光子成像技術拍攝熒光圖像。良性肉芽腫(藍圈)和腫瘤(黃圈)區域都有PARPi-FL積累,但是特異性的PARPi-FL僅在腫瘤中可檢測到。表明了相較于良心增生組織,腫瘤對于PARPi-FL具有很強的特異性,可以應用于影像學提高癌癥檢出率。雖然使用PARPi-FL作為熒光造影劑還在臨床試驗中,但上述實驗可以證明使用漱口水的方法進行局部腫瘤活體評估已成為可能。圖4. ViewnVivo活體熒光內窺式激光共聚焦成像系統       Z后,搭配ViewnVivo活體成像技術的PARPi-FL激光成像結果與免疫組化PARP1組織切片染色結果非常相似,活體成像Z快 1分鐘即可完成。一旦外科醫SF現陽性邊緣,可以立即進行再次切除和邊緣評估。在PARPi-FL共聚焦熒光成像后可保持新鮮組織完整,該組織可用于后續其他研究,如組織病理學、蛋白質組學或基因組分析。圖5. 操作簡便的ViewnVivo成像效果與光學顯微鏡下免疫組化染色結果相媲美       相信不久以后,活體熒光內窺式激光共聚焦成像技術診斷惡性腫瘤方法會普及應用到早期鱗狀上皮癌癥的診斷,幫助外科醫生對手術進行評估,提高檢出率,減少患著痛苦。
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2018-11-20 08:51:01激光共聚焦拉曼光譜與普通拉曼光譜有何不同
 
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